7–10 de noviembre de 2023
Asunción
America/Asuncion zona horaria

Optimización de una qPCR con sondas Taqman para caracterización molecular del polimorfismo del Exon 8 del gen de HLA-G en muestras cervicales de mujeres paraguayas con infección de virus de papiloma humano

No programado
20m
Sociedad Científica del Paraguay (Asunción )

Sociedad Científica del Paraguay

Asunción

Andrés Barbero 230 casi Avenida Artigas
Presentación Oral Ciencias de la Salud y Biomedicina;

Ponente

Florencia del Puerto (Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud)

Descripción

Introducción: El cáncer de cuello uterino (CCU) por el virus del papiloma humano (VPH) en Paraguay es un grave problema de salud pública. Poco se conoce sobre el polimorfismo del HLA-G en la carcinogénesis, particularmente la Ins/Del de 14 pb situada en la región 3´ no traducida del transcripto (UTR´3) en su exón 8. El producto de este gen está relacionado a la inhibición de la inmunidad mediada por células lo que podría permitir a los virus oncogénicos y las células cancerosas superar la vigilancia inmunitaria del huésped.

Objetivo: Optimizar una qPCR con sondas Taqman para caracterización molecular del polimorfismo del Exon 8 del gen de HLA-G en muestras cervicales de mujeres paraguayas VPH positivas con diferente severidad de lesión como posible biomarcador de pronóstico.

Metodología: Estudio piloto observacional-descriptivo. La amplificación por qPCR del Exon 8 del gen HLA-G se realizó con sondas Taqman que diseñamos para detectar una inserción/deleción de 14 pb (I/D-E8), usando Premix Ex Tak (Takara) y los primers reportados por Bermingham J et al. 2000. Se incluyeron 57 muestras; 20 sin lesión-NSIL, 19 con neoplasia intraepitelial cervical grado 1-CIN1 y 18 con lesión (CIN3 o cáncer insitu) pertenecientes a un estudio previo.

Resultados: Se logró optimizar una qPCR que identifica homocigotas (I/I-E8 y D/D-E8) y heterocigotas (I/D-E8) para los 14 pb de la región UTR 3´del HLA-G. La distribución según diagnóstico anatomopatológico del alelo D/D-E8 fue 5(25%), 6(32%), 4(22%), la del alelo I/D-E8 fue 10(50%), 7(37%), 8 (44%) y del alelo I/I-E8 fue 5 (22%), 6(44%) y 6 (33%) respectivamente, en cada caso mencionado (NSIL, CIN1 y CIN3).

Conclusión. Los resultados preliminares sugieren una distribución de alelos comparable según severidad de lesión. Como perspectivas del estudio se pretende aumentar el tamaño de muestras y analizar su potencial como biomarcador en otros cánceres.

Conclusión

Los resultados preliminares sugieren una distribución de alelos comparable según severidad de lesión. Como perspectivas del estudio se pretende aumentar el tamaño de muestras y analizar su potencial como biomarcador en otros cánceres.

Objetivo

Optimizar una qPCR con sondas Taqman para caracterización molecular del polimorfismo del Exon 8 del gen de HLA-G en muestras cervicales de mujeres paraguayas VPH positivas con diferente severidad de lesión como posible biomarcador de pronóstico.

Metodología

Estudio piloto observacional-descriptivo. La amplificación por qPCR del Exon 8 del gen HLA-G se realizó con sondas Taqman que diseñamos para detectar una inserción/deleción de 14 pb (I/D-E8), usando Premix Ex Tak (Takara) y los primers reportados por Bermingham J et al. 2000. Se incluyeron 57 muestras; 20 sin lesión-NSIL, 19 con neoplasia intraepitelial cervical grado 1-CIN1 y 18 con lesión (CIN3 o cáncer insitu) pertenecientes a un estudio previo.

Resultados

Se logró optimizar una qPCR que identifica homocigotas (I/I-E8 y D/D-E8) y heterocigotas (I/D-E8) para los 14 pb de la región UTR 3´del HLA-G. La distribución según diagnóstico anatomopatológico del alelo D/D-E8 fue 5(25%), 6(32%), 4(22%), la del alelo I/D-E8 fue 10(50%), 7(37%), 8 (44%) y del alelo I/I-E8 fue 5 (22%), 6(44%) y 6 (33%) respectivamente, en cada caso mencionado (NSIL, CIN1 y CIN3).

Introducción

El cáncer de cuello uterino (CCU) por el virus del papiloma humano (VPH) en Paraguay es un grave problema de salud pública. Poco se conoce sobre el polimorfismo del HLA-G en la carcinogénesis, particularmente la Ins/Del de 14 pb situada en la región 3´ no traducida del transcripto (UTR´3) en su exón 8. El producto de este gen está relacionado a la inhibición de la inmunidad mediada por células lo que podría permitir a los virus oncogénicos y las células cancerosas superar la vigilancia inmunitaria del huésped.

Area Ciencias de la Salud y Biomedicina

Autores primarios

Florencia del Puerto (Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud) Dr. Laura Mendoza (Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Universidad Nacional de Asunción)

Coautores

Dr. Pamela Mongelós (Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Universidad Nacional de Asunción) Dr. Fernando Vera Dr. Chyntia Díaz (Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Universidad Nacional de Asunción) Dr. María Isabel Rodríguez (Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Universidad Nacional de Asunción) Dr. Malvina Paez (Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Universidad Nacional de Asunción) Dr. Elena Kasamatsu (Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Universidad Nacional de Asunción) Dr. Ana Soilán (Hospital Materno Infantil de San Lorenzo, Ministerio de Salud Pública y Bienestar Social) Dr. Marina Ortega (Instituto Nacional del Cáncer, Ministerio de Salud Pública y Bienestar Social) Dr. Ana Soskin (Hospital Nacional de Itauguá, Ministerio de Salud Pública y Bienestar Social) Dr. Amalia Castro (Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Universidad Nacional de Asunción)

Materiales de la presentación

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