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Descripción
Introducción: Existen más de 60 enfermedades zoonóticas transmitidas de los caninos a humanos, como la leishmaniasis, toxocariosis, leptospirosis, hidatidosis y ehrlichiosis. Esto hace evidente la necesidad de pruebas diagnósticas rápidas y confiables en el campo de las enfermedades caninas siendo una de las principales limitantes el elevado costo y la disponibilidad de los reactivos comerciales. El objetivo de este estudio fue optimizar la producción de anticuerpos policlonales anti-IgG canino en el modelo animal conejo, para ser aplicados en pruebas diagnósticas. Materiales y Métodos: Se aplicó el diseño experimental, utilizando IgG canino purificado como antígeno para la obtención de anticuerpos policlonales anti IgG canino en conejos. Se siguió el esquema de inmunización con coadyuvante completo e incompleto de Freund. Se detectaron los anticuerpos policlonales anti IgG canino de conejo y se purificó por cromatografía de intercambio iónico. Se probó la funcionalidad por medio de la inmunodifusión radial (IDR) y se conjugó con enzima peroxidasa (POD) por el método del periodato. El anticuerpo conjugado fue utilizado como anticuerpo secundario en el método de ELISA indirecto para la detección de IgG canina anti-Leishmania chagasi. Resultados Se ha obtenido anticuerpos IgG anti canino de conejo, 9 mg de IgG en 25 ml de suero obtenido por conejo y un rendimiento de 0.36mg/ml. El conjugado IgG anti-canino de conejo con la enzima peroxidasa tuvo un rendimiento de dilución 1:500 a 1:1000 en el ELISA indirecto para la determinación de IgG canina anti leishmaniasis visceral de suero de conejo. Conclusión: Los resultados de este trabajo permitirán producir a nivel local pruebas de diagnóstico de uso veterinario para enfermedades caninas
Introducción
Existen más de 60 enfermedades zoonóticas transmitidas de los caninos a humanos, como la leishmaniasis, toxocariosis, leptospirosis, hidatidosis y ehrlichiosis. Esto hace evidente la necesidad de pruebas diagnósticas rápidas y confiables en el campo de las enfermedades caninas siendo una de las principales limitantes el elevado costo y la disponibilidad de los reactivos comerciales
Conclusión
Los resultados de este trabajo permitirán producir a nivel local pruebas de diagnóstico de uso veterinario para enfermedades caninas
Resultados
Se ha obtenido anticuerpos IgG anti canino de conejo, 9 mg de IgG en 25 ml de suero obtenido por conejo y un rendimiento de 0.36mg/ml. El conjugado IgG anti-canino de conejo con la enzima peroxidasa tuvo un rendimiento de dilución 1:500 a 1:1000 en el ELISA indirecto para la determinación de IgG canina anti leishmaniasis visceral de suero de conejo
Metodología
Se aplicó el diseño experimental, utilizando IgG canino purificado como antígeno para la obtención de anticuerpos policlonales anti IgG canino en conejos. Se siguió el esquema de inmunización con coadyuvante completo e incompleto de Freund. Se detectaron los anticuerpos policlonales anti IgG canino de conejo y se purificó por cromatografía de intercambio iónico. Se probó la funcionalidad por medio de la inmunodifusión radial (IDR) y se conjugó con enzima peroxidasa (POD) por el método del periodato. El anticuerpo conjugado fue utilizado como anticuerpo secundario en el método de ELISA indirecto para la detección de IgG canina anti-Leishmania chagasi.
Objetivo
Optimizar la producción de anticuerpos policlonales anti-IgG canino en el modelo animal conejo, para ser aplicados en pruebas diagnósticas
| Area | Ciencias de la Salud y Biomedicina |
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